食物微生物DNA提取试剂盒

PowerFood™ Microbial DNA Isolation Kit可提取根据FDA指南（细菌学分析法，第8版，A/1998修订版）培养的食物微生物高质量基因组DNA。此试剂盒联合使用了我们的抑制因子去除技术®（IRT）和改进的缓冲液，提高DNA得率的同时，完全去除抑制因子，最终DNA可直接用于下游PCR、qPCR等试验。

成功使用PowerFood™ Microbial DNA Isolation Kit提取并实时PCR检测得到的食物病原如下表。

提取未经培养的食物DNA

可以从液体或固体食物中直接提取DNA。微生物DNA得率虽小，但也能通过PCR扩增检测得到。无论匀浆固体食物还是液体，微生物都可能与部分食物成分同时离心下来。加入PF1前使用枪头尽可能移除上层脂肪和食物匀浆。

l   固体食物：0.25g食物、 0.75ml PBS（自备）加入到一个2ml Collection Tube（试剂盒提供）。13000g离心1~3min。使用枪头尽可能移除食物残渣和上层液体，不要触动底部沉淀球。加入450μl PF1开始提取。

l   液体食物：取1-1.8ml液体食物13000g离心1~3min。使用枪头尽可能移除食物残渣、脂肪、液体，不要触动底部沉淀球。加入450μl PF1开始提取。

下列食物样品微生物DNA可直接提取并能成功PCR扩增：奶油（12%，25%脂肪），布里干酪（37%脂肪），橙汁、草莓、生菜、芦笋和牛奶黑巧克力。

微生物沉淀球中出现未磨碎食物残渣

食物成分会有可能连同操作步骤2的微生物细胞一同离心沉淀。根据食物类型不同，沉淀小球可大可小。按照说明书要求重悬整个沉淀小球即可。

可选裂解方法（每次提取建议只采用其中一个裂解方法）

l   为了增加得率：加热可辅助裂解部分类型微生物细胞，从而提高得率。步骤4完成后，65℃水浴10min，接着步骤5继续。

l   为了减少DNA断裂：步骤4后，65℃水浴10min，期间每2-3min稍微涡旋振几秒。忽略步骤5、6，直接进入步骤7。可尽可能减少对大片段DNA的损害。此方法会降低DNA断裂的同时，对于部分类型微生物可提高DNA得率。

l   细胞难裂解：步骤4完成后，70℃水浴孵育10min。接着步骤5继续。