乳酸菌检测试剂盒说明书
一、原理
本试剂盒采用MPN法检测乳酸菌。培养管中的干粉培养基提供乳酸菌生长所需营养,接种后滴加吸氧剂吸收氧气造成厌氧环境,并能有效隔绝氧气。本试剂盒不需要任何厌氧设备即能实现乳酸菌检测。
二、包装规格
培养管:10管/T,10T/盒,吸氧剂:100mL/盒;18盒/箱。
三、检验方法
1.样品制备
按常规方法制备样品稀释液(推荐稀释液为无菌生理盐水,所用生理盐水必须为新鲜配制的或者于沸水浴中煮10分钟,冷却后备用。不可使用磷酸盐缓冲液),根据样品中乳酸菌数量推测选择3个连续稀释度备用。
2.接种
打开培养管盖,吸取1mL无菌生理盐水加入到培养管中作为阴性对照(使用新鲜配制的生理盐水或者于沸水浴中煮10分钟,冷却后备用)。选取的3个连续稀释度样液每个稀释度接种3管培养管,每管1mL。接种好的培养管插回到泡沫盒孔中并标记好样品号和稀释度。将培养管颠倒混匀,直至干粉培养基完全溶解。接种后的培养管每管滴加0.8mL吸氧剂。
3.培养
接种后的培养管于36℃±1℃需氧培养48h±2h。
4.计数
培养结束后取出培养板,从板底管孔处观察培养管颜色变化,和对照管比较,黄色、橘黄色为阳性,不变为阴性,若培养管底部有黄色沉淀,上层培养液为红色,应延长培养时间再观察。根据各稀释度阳性管数查MPN表(见附表),得到样品中乳酸菌数量。废弃物需经121℃高压灭菌20分钟后处理。
四、储存
常温避光干燥处保存,保质期18个月,开封后用自封口袋封好避光干燥处保存,并于2个月内用完。