科玛嘉李斯特菌显色培养基用于分离和鉴定单核增生李斯特菌。
一、组成
科玛嘉李斯特菌基础培养基和增补剂各一瓶。
干粉贮存于15-30℃环境中,增补剂贮存于2-8℃环境中。
二、成分(g/L)
琼脂: 15.0 蛋白胨和酵母浸出物 23.0 NaCl 5.0 色素 17.5
pH:7.0±0.2
三、操作:
⊙基础干粉
取瓶内科玛嘉李斯特菌显色培养基基础干粉加入1000ml蒸馏水中(可根据需要按照51.5g/L的比例扩大或缩小),搅拌至琼脂溶解。常规高压灭菌(121℃,15min),然后水浴冷却至47±2℃。
⊙增补剂
取增补剂一瓶加入40ml无菌水中(可根据需要按照9g/L的比例扩大或缩小),用磁力搅拌器快速搅拌(700-1000rpm)均匀(时间不少于30分钟),使其完全溶解,终成为奶油状的匀质溶液。把混匀后的增补剂加入到冷却好的科玛嘉李斯特菌显色培养基基础培养基中,轻轻混匀,然后倾入无菌培养皿中,使其凝固。此成品平板可在室温保存一天;在冰箱里可保存两周(2-8℃,避光)。
⊙使用:
x g或x ml样品加入9 x Fraser 1/2肉汤,30±1℃培养24±2h。
然后取100微升于平板上划线接种,37±1℃培养24±2h。