科玛嘉大肠杆菌显色培养基用于大肠杆菌的鉴定和计数。
一、组分
琼脂 15.0g/L
蛋白胨、牛肉膏、酵母膏 8.3 g/L
色素 9.0 g/L
盐类 5.0 g/L
PH 6.0±0.2
根据需要,可以进行经典配方的调整或补充。
二、操作
称取瓶内科玛嘉大肠杆菌显色培养基干粉,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,可以按照37.3 g/L的比例扩大、缩小。
将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中,充分搅拌直至琼脂完全溶解。
加热至100℃,并且不断搅拌。如果使用高压锅,请不要加压,加热不能超过100℃。使用微波炉加热时,在煮沸后立即移出微波炉并不断搅拌,而后移入微波炉再加热,直至完全溶解(大气泡代替泡沫产生,大约需要2分钟)。
使用倾注程序:将培养基水浴冷却至48℃,准备直径为90mm的已灭菌的带盖培养皿,每个培养基接种1ml样品,然后倾注15ml上述已充分溶解的培养基,混合均匀使其凝固,倒置,37℃培养24小时。
如果使用表面接种程序:将科玛嘉大肠杆菌显色培养基倾注于已灭菌的培养皿中(用前贮存于2-8℃,避光,接种前应先恢复至室温)。样品划线接种或者将接种样品的膜放置于培养基表面,在37℃培养24小时。
注意:如果要求对共生菌丛有较强的抑制作用,可在44℃培养。