细胞货号: C0162
"选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做和氧化方面的,而这种培养基中含有剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。细胞缩写:" C8-D1A细胞
细胞名称: C8-D1A(小鼠脑星形细胞)
背景资料: 见细胞说明书
细胞来源: 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学建系
代次: P4
规格: 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
"细胞冻存及复苏基本知识普及:
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、C8-D1A小鼠脑星形细胞系寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO,可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。
采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。细胞数:" 1*10(6)
生物安全级别: 1
生物体: 小鼠
组织来源: 脑
细胞形态: 神经元细胞样
细胞特性: 贴壁
细胞活力: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测: 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
"细胞常规培养传代流程请严格遵照无菌操作
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞注意把握消化时间,通常控制在1-2min
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时不建议消化到细胞漂浮去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液每周2-3次,待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。培养条件:" 详见细胞说明书
传代方法: 建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件: 详见细胞说明书
主要文献: 请具体查阅相关发表文章
公司已合作单位有广西医科大学、中山大学附属医院、复旦大学、南方医科大学、浙江大学医学院附属邵逸夫医院、深圳市孙逸仙心血管医院、福建省立医院、上海宠乐道宠物医院、中国科学院上海高等研究院、北京市昌平区中西医结合医院、中国医学科学院医院、云南中医学院、绍兴市人民医院、汕头大学医学院、首都医科大学附属北京同仁医院、总医院、上海瑞金医院、北京宣武医院、吉林大学临床医院、北京中医药大学附属东直门医院、北京天坛医院、复旦大学附属医院、北京协和医院、河北医科大学第二医院、北京总医院、上海市中医医院、复旦大学附属儿科医院、浙江省中医院、上海华山医院、哈尔滨医科大学附属医院、西安唐都医院、上海长征医院、广州珠江医院、上海仁济医院、山西省眼科医院、航天中心医院、中山大学医院、重庆新桥医院、浙江大学附属第二医院、总医院(301医院)、北京大学第三医院、广州广州总院、北京大学人民医院、山西医科大学第二医院、、广州中医药大学附属医院、宁波市第二医院、广州南方医院、西京医院、复旦大学附属中山医院、浙江大学医学院附属医院、重庆医科大学第二医院、北京地坛医院、北京大学医院、中山大学附属医院、天津市医院、武汉协和医院研究所、第二军医大学东方肝胆外科医院、北京医院、湖南省医院、南方医院、广东省人民医院、北京市广安门医院、北京同仁医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、C8-D1A小鼠脑星形细胞系上海仁济医院(西部)、山东大学齐鲁医院、总医院C1858 PK13猪肾细胞系 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养的技术支持,让您实验再无烦扰!
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