滑膜成纤维细胞

 MH7A类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 MH7A(类风湿关节炎滑膜成纤维细胞)
【细胞货号】 C0878
【细胞缩写】 MH7A细胞
【细胞名称】 MH7A(类风湿关节炎滑膜成纤维细胞)
【背景资料】 慢性間接リウマチ患者滑膜細胞をSV40 T antigenにより転換し株化したもの。IL-1betaに反応しIL-6を産生するという。
Rheumatoid fibroblast-like synoviocyte transformed with SV40 T antigen. Respond to IL-1beta.
【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学建系
【代次】 P4
【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
【细胞数】 1*10（6）
【生物安全级别】 1
【生物体】 人
【组织来源】 滑膜
【细胞形态】 成纤维细胞样
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 Fujishiro Maki et al. 2012 Apr. Mod Rheumatol 22(2):228-37.,
Seong Ah-Reum et al. 2011 Jul. Biochem. Biophys. Res. Commun. 410(3):581-6.,
Igarashi Hideya et al. 2012 Jan. Immunol. Lett. 141(2):246-53.,
Bader Rebecca A et al. 2011 Feb. Biomacromolecules 12(2):314-20.,
Bader R A et al. 2010 Jul. Cytokine 51(1):35-41.,

Nozawa Kazuhisa et al. 2009. Arthritis Res. Ther. 11(6):R174.

接收后的操作流程与注意事项：

1、如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决

2、贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度（不能超过20%），或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养

3、生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）

1、吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在1-2min）

2、镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6-8ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散

3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养

4、注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存

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