玫瑰红钠琼脂培养基

　　(Rose Bengal AgarⅡ)

　　用 途：

　　玫瑰红钠琼脂培养基供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。(《药典》2010年版)

　　原 理：

　　胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长;琼脂是培养基的凝固剂。

　　配方(每升)：

　　胨 5.0g

　　葡萄糖 10.0g

　　磷酸二氢钾 1.0g

　　硫酸镁 0.5g

　　玫瑰红钠 0.0133g

　　琼脂 14.0g

　　最终pH 6.0±0.2

　　使用方法(计数用法)：

　　1、 称取玫瑰红钠琼脂培养基30.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。

　　2、 检样的稀释处理，略。

　　3、 根据对样品污染情况的估计，选择3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1.0mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2～3个平皿。

　　4、 将凉至45℃左右的培养基约15mL注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于23～28℃温箱中培养72h，对于菌落微小点计困难的平板可延续培养到4～5d再进行观察计数。

　　5、 计数、报告：

　　(1) 计数：一般情况下，玫瑰红钠平板计点霉菌或酵母菌数，如在该平板上生长的细菌菌落数多于营养琼脂平板上生长的菌落数时，则应同时点计细菌数，并将该菌数作为供试品的细菌数报告。固体供试品在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌落数，液体供试品则需在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌与酵母菌菌数;含蜂蜜及王浆的合剂需以玫瑰红钠平板的霉菌菌落数加上酵母膏粉胨葡萄糖琼脂平板的酵母菌菌落数作为供试品的霉菌、酵母菌总数。

　　(2) 报告：通常选择菌落数在30～100之间的稀释级的平板计数，以该稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告。

　　质量控制：

　　本品倾注平皿后呈玫瑰红色，下列菌株接种后23～28℃培养72h生长情况如下表。

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1. 《药典》2010年版，附录XI J 微生物限度检查。