用来进行蛋白质、肽及其他药物制剂的氨基酸组成或含量的测定的仪器,称为氨基酸分析仪。必须先蛋白质及肽水解成单个氨基酸,然后再进行氨基酸分析。其是以阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定为基准的离子交换色谱仪。
基本原理
氨基酸混合物在流动相(缓冲溶液)的推动下从装有阳离子交换树脂的色谱柱流经流经,各氨基酸与树脂中的交换基团交换离子。当洗脱时使用的pH缓冲溶液不同时,氨基酸混合物由于不同的交换能力而分离,分离出的单个氨基酸组分与茚三酮试剂发生反应,生成紫色化合物或黄色化合物,其在570nm、440rnn的吸光度用可见光检测器进行检测。
这些有色产物对应的吸收强度与洗脱出来的各氨基酸浓度之间的关系和朗伯-比尔定律相符合。以此为依据可以定性、定量分析氨基酸各组分氨基酸分析仪也可利用阴离子交换分离后经积分脉冲安培法检测。此检测方法不需要柱前或柱后衍生待测氨基酸。
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