孔雀石绿酶联免疫(ELISA)快速检测试剂盒
1概要
孔雀石绿(malachite green,MG)又名碱性绿、盐基块绿、孔雀绿,苯胺绿、维多利亚绿或中国绿等,属三苯甲烷类染料,曾被广泛用于预防和治疗各类水产动物的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病等。但孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿在水产品体内会产生高残留。人食用后易引起致癌、致畸和致突变等副作用。欧盟、美国以及部分东亚国家均已禁止将孔雀石绿用作渔类的抗真菌药物,我国于2002年5月也将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。
本试剂盒可用于定量、定性检测鱼、虾、以及鱼池或者鱼缸水样中的孔雀石绿或无色孔雀石绿(需氧化后测定)残留。
2 检测原理
本试剂盒采用直接竞争抑制法检测样本中的孔雀石绿。在微孔板上预包被抗孔雀石绿单克隆抗体,样本或标准品中的孔雀石绿和HRP标记的孔雀石绿竞争结合微孔板中抗孔雀石绿单克隆抗体,洗涤后用H2O2-TMB底物系统显色,样本吸光度值与其所含孔雀石绿量成负相关,与标准曲线比较即可得出孔雀石绿含量。
3 试剂盒组份
每个试剂盒中的试剂可进行96个测量(包括标准测定),试剂盒组分:
包被有抗孔雀石绿抗体微孔板--------------------------------------------------- 96孔(8孔/条×12条)
孔雀石绿标准品溶液:----------------------------------------------------------------1.5 mL/每瓶(6瓶)
0号:0 ppb; 1号:0.05 ppb;2号:0.15 ppb;3号:0.5 ppb;4号:1 ppb;5号:2 ppb;
孔雀石绿标记HRP溶液-----------------------------------------------------------------------1瓶(6 mL)
底物溶液A----------------------------------------------------------------------------------------1瓶(7 mL)
底物溶液B----------------------------------------------------------------------------------------1瓶(7 mL)
终止液(含2 M的硫酸)----------------------------------------------------------------------1瓶(6 mL)
20×浓缩洗涤液-----------------------------------------------------------------------------------1瓶(50 mL)
封板膜----------------------------------------------------------------------------------------------3张
说明书----------------------------------------------------------------------------------------------1份
4 另外所需试剂和仪器
4.1 试剂
--二氯甲烷(分析纯)
--乙腈(色谱纯)
--正己烷(分析纯)
--甲醇(分析纯)
4.2 设备
--微孔板酶标仪(450 nm)
--恒温箱(37℃)
--天平(精度0.01 g)
--匀浆器
--振荡器
--超声波清洗器(工作频率不小于40KHZ)
--离心机和离心管
--旋转蒸发器或氮气吹干仪
--可调式0.5μL~20 μL, 20 μL~200 μL 和100 μL~1000 μL 微量移液器
--多道移液器
4.3 耗材
10 mL圆底带盖离心管