定量测定的稀释法(dilution test),主要测定细菌对某药的抑菌浓度,包括肉汤稀释法和琼脂稀释法。
用商品化的96孔板(孔板里面包被好不同种类和倍比稀释浓度的抗生素),报告小抑菌浓度(MIC值,μg/ml)。接种待测菌,35℃孵育16-24h,判定测试菌的MIC。
具体方法如下:
1、菌液制备:挑取菌落数个,置2~3mL 灭菌生理盐水中,用0.5麦氏比浊管进行比浊,调制菌液浓度为0.5个麦氏单位。
2、稀释:取上述菌液60μL,滴入无菌加样槽(公司提供)中,加营养肉汤培养液1支(11ml),混匀。
3、加样:用8通或12 通微量移液器,吸取稀释菌液100μL,加入96 孔微量药敏板。
4、培养:将板条放入恒温培养箱中,35℃±2℃,16-20小时
5、结果判读:自培养箱中取出板条,判读各个孔的阴阳性结果,混浊为阳性,清晰为阴性。