《环糊精葡萄糖基转移酶的制备与应用》是反映CGT酶研究成果的学术专著,是作者将长期从事酶工程科研、教学和应用的研究成果加以整理,并结合国内外资料汇集而成。主要介绍CGT酶及其催化机理,CGT酶的产物特异性改造、热稳定性改造、重组表达、发酵优化,利用CGT酶制备各种类型环糊精,以及基于CGT酶的其他产品制备技术,包括2-氧—a-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸、甜菊糖苷和偶合糖的制备。环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)是一种多功能酶,可将淀粉转化为环糊精,环糊精及其衍生物作为高附加值产品有着广泛应用。
《环糊精葡萄糖基转移酶的制备与应用》可作为生物工程、食品科学与工程等专业的教学参考书,也可供相关专业技术人员参考。
节 CGT酶概述3
第二节 CGT酶的三维结构5
第三节 CGT酶的催化机理7
一、CGT酶与底物结合的分子机制7
二、CGT酶的转糖基反应机理9
三、CGT酶的环化机理12
节 CGT酶产物特异性的研究进展17
第二节 P?macerans岐睠GT酶的克隆表达及性质研究23
一、P?macerans岐睠GT酶在大肠杆菌中的克隆表达24
二、重组P?macerans岐睠GT酶的分离纯化26
三、重组岐睠GT酶的性质30
第三节 定点突变提高CGT酶的岐不泛??匾煨
一、和突变CGT酶的表达与纯化39
二、定点突变影响CGT酶的环糊精形成活力40
三、定点突变影响环糊精的生产43
第四节 定点突变提高CGT酶的猹不泛??匾煨
一、多重序列比对48
二、和突变CGT酶的表达与纯化50
三、Lys47对产物特异性的影响51
节 CGT酶高温解折叠研究61
一、研究方法介绍62
二、CGT酶的分子动力学模拟65
第二节 盐桥与CGT酶耐热性的关系研究83
一、研究方法介绍84
二、CGT酶热不稳定区分析87
节 CGT酶的发酵109
一、种子的培养与保存109
二、摇瓶水平的工艺优化113
三、发酵罐水平的工艺优化131
第二节 CGT酶制剂稳定性153
节 环糊精含量的分析161
一、色谱法161
二、毛细管电泳163
三、分光光度法163
四、其他方法174
第二节 环糊精的制备工艺174
一、非控制过程174
二、控制过程176
第三节 影响环糊精得率的因素180
一、底物180
二、反应条件184
节 2?氧?岐睤?吡喃葡萄糖基抗坏血酸的制备195
一、AA?2G的合成方法196
二、AA?2G转化合成中关键因素的确定198
三、AA?2G转化条件优化200
第二节 甜菊糖苷的制备210
一、CGT酶的筛选211
二、反应条件对转葡萄糖基反应的影响213
三、改性后产物的甜味评价221
第三节 偶合糖的制备226
一、利用CGT酶生产偶合糖工艺227
二、偶合糖的精制228
三、偶合糖的结晶229