愈创木酚检测试剂盒

◆背景

 

嗜酸耐热菌Alicyclobacillus   acidoterrestris是革兰氏阳性，产芽胞厌氧菌，在自然界中普遍存在。1984年透明苹果汁混浊事件后该物种被大量研究。生长在相对高的温度和酸性条件下的Alicyclobacillus类细菌，称为热-嗜酸性杆菌（TAB） [1, 2,   3].

TAB不能通过巴氏消毒法被灭菌，可能残留在合成的食物和饮料中。尚不清楚TAB是否对人体有害，但产生有异味的愈创木酚，会降解果汁和其他产品的质量。即使没有异味，在分配过程中轻微恶化引起的降解也会降低产品的质量。                                                                                                                                

避免TAB污染是非常困难的，特别是在土壤中。幸运的是，引起污染的   

A. acidocaldarius 和其他主要物种被认为是无害的，TAB引起的损害能够通

过监测被认为有害的A. acidoterrestri来缩小。因为这些物种生长相对高温

和酸性的条件下，不能通过常规的提取培养的方式进行检测。                 

 

由于欧洲和其他区域经常发生果汁质变事件，2003年3月日本果汁联合会研发和出版了同一检测TAB方法 [4]。为了容易进行该项检测，我们研发了该试剂盒。该试剂盒不同于会产生异味的愈创木酚的A. acidoterrestri试剂盒。Guaiacol Detection Kit Reference                                                                                                                                                                                               

                                                                                                                                                                                       

           

 

◆试剂盒组成

 

YSG 琼脂板20 块板(货号KYO-06810)

TAB纯化的YSG琼脂培养基

10 x 2 板/1 盒

 

a-YSG 培养基 (2mL) 100 个管子(货号KYO-08901)

加入到YSG培养基的Vanillic acid ，用于愈创木酚的形成

2 mL x 100 管

 

愈创木酚检测试剂盒 100 次 (货号KYO-08921)

试剂 1: 50mM 苯二甲酸氢钾缓冲液	60 mL x 2 瓶
试剂 2: 1.3 % 过氧化氢溶液	2.5 mL x 1 管
试剂 3:过氧化物酶-磷酸缓冲液	2.5 mL x 1 管
阳性对照: Guaiacol   (1050 ppm)	2.5 mL x 1 管

 

◆TAB测试流程图-日本果汁协会

 

 

  

 

◆实验流程

1. 用接种环，10ul，在YSG琼脂板上提取的新克隆，该克隆还没有形成孢子。在  “Va-YSG medium (2mL), ” (≥1 x 10 8cfu/mL)管内重悬该克隆。.

2. 孵育 45±1°C ，3小时。

3. 加入 1 mL “Guaiacol Detection Kit”的试剂1。

4. 加入 20 μL   “Guaiacol Detection Kit”的试剂 2 。

5. 加入 20 μL 试剂 3 of “Guaiacol Detection Kit”试剂3.

6. 混匀。

7. 放置5-10 分钟。

8.检测培养基颜色的变化。在10分钟内读数。

 

 

Brown color indicates contamination of AAT

 

空白 (阴性对照) 

使用没有接种的"Va-YSG medium (2mL)" ，进行步骤(2)-(8).

阳性对照

2 mL 灭菌水和100 µL阳性对照混合，进行步骤 (3)-(8).

 

处理信息

• 请使用高压灭菌方式处理已经使用的培养基（121摄氏度，超过30分钟)

• 保存条件: 2-10 摄氏度，避光。

• 保质期：制造后12个月

一般我们提供的产品保质期在3个月到10个月。

产品编号

	产品名称	产品规格	产品等级	产品价格
KYO-06810	YSG Agar Plate	20 PLATE	-	-
KYO-08901	Va-YSG Medium	100 PC
KYO-08921	Guaiacol Detection Kit   ,	100 TEST