科玛嘉ECC显色培养基
此科玛嘉ECC显色培养基用于大肠杆菌及粪大肠菌群的鉴定和计数。
一、组分
琼脂 15.0 g/L
蛋白胨、牛肉膏、酵母膏 8.0 g/L
NaCl 5.0 g/L
色素 4.8g/L
PH 7.2±0.2
可以根据需要,进行经典配方的调整和/或补充。
二、操作
1.取瓶内科玛嘉ECC显色培养基干粉,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,也可以按照32.8g/l的比例扩大、缩小。
2. 将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中,搅拌至充分溶解。
3. 加热至100℃,并按常规不断搅拌。如果用高压灭菌锅,不要加压,加热不能超过100℃。混合物也可以在微波炉中加热,用此法加热,煮沸后混合物立即移出微波炉并轻轻搅拌,而后移入微波炉再加热,直至琼脂完全溶解(大量气泡代替泡沫产生,大约需要2分钟)。
4.使用倾注程序:将科玛嘉ECC显色培养基水浴冷却至48℃,准备直径为90mm的已灭菌的带盖培养皿,每个培养皿接种1ml样品,然后倾注10ml上述溶解的培养基,混匀使其凝固,倒置,37℃培养24小时。
5.如果用表面接种程序:将培养基倾注于已灭菌的培养皿中,使其凝固,在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。将样品划线接种或者将接种样品的膜放置于培养基表面,37℃培养24小时。
注意:如果接种对象考虑为粪大肠菌群,应在44℃培养。