弧菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、海产品、病人粪便样品和水产品中副溶血性弧菌的快速检测。副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色、蓝色或无色且菌落比较小;其它细菌绝大部分被抑制。本培养基的特异性高,可以克服TCBS培养基引起的假阴性结果,是一种很理想的快速检测培养基。
成份(g/L)
特殊营养物质 |
75.0
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混合显色剂 |
4.45
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琼脂 |
15.0
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此配方可以进行改良或增加营养成份以获得的结果。
用法
称取本品 18.9g 加入 200ml 蒸馏水,加热煮沸溶解并不停搅拌,加热 2-5 分钟。冷却至 45-50℃ 时,倾入无菌平皿。
注意:制备好的培养基一定要保持表面干燥,可在 37℃ 的培养箱中倒置放置1-2小时。
操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液;
2、取 1ml 样品液加入 9ml SCPB肉汤或碱性蛋白胨水中,36℃ 增菌培养 18-24 小时;
3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到弧菌显色培养基上,做 2 个平板;
4、36℃ 培养 18-24h,副溶血性弧菌显蓝绿色,菌落比较大;霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色、蓝色或无色且菌落比较小,其它细菌绝大部被抑制;
5、对可疑菌落可划线接种到营养琼脂平板上,36℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做副溶血性弧菌全套生化试验。
质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的平板呈淡粉色至黄色固体培养基。
2、微生物试验
在36℃培养18-24h小时:
质控菌株
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ATCC
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生长情况
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菌落颜色
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副溶血性弧菌
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17802
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+++
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蓝绿色,菌落比较大
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金黄色葡萄球菌
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25923
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-
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-
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大肠杆菌
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25922
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-/+
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无色
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溶藻弧菌
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17749
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+++
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红色且菌落比较小
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非01群霍乱弧菌
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+++
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红色
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方法的局限性
本培养基不能直接鉴定霍乱弧菌,副溶血性弧菌的特异性可达 90%,准确性非常高,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
典型副溶血性弧菌显蓝绿色且菌落比较大,霍乱弧菌显红色,其它弧菌显红色、蓝色或无色且菌落比较小。
贮存
制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
注意
此培养基仅供实验室使用。