1、原理及适用范围 选择性培养基和专一性的酶显色剂,运用微生物测试片专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15~24h就可确认是否有病原菌的存在,大大地简化了检测程序。本产品适用于各类生、熟食制品,饮料,糕点类,调味品,奶制品等的快速检测。执行标准:食品安全国家标准食品微生物检验。 2、操作方法 2.1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸盐缓冲液或生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,调节样品匀液pH至6.0~8.0。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,每次换一支吸管。 2.2、接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,将检验纸片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个稀释度接种两片。做一片空白阴性对照。 2.3、培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。(霉菌 培养温度为28℃±1℃,培养48~72h) 3、结果判读 培养后,观察测试片上不同颜色的菌点,对应不同的菌群,即为目标菌。出现阳性菌落的样本,用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验一次。 4、计数原则及报告方式 4.1、 选择菌落数在20~200个之间的纸片进行计数。 4.2 、若两个稀释度的菌落数均在20~200之间,则取其平均菌落数乘以稀释倍数,即为每毫升(或每克)样品中金黄色葡萄球菌数。 4.3、 如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于20,则计数稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之;如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以小于1乘以稀释倍数报告之。 4.4 如果所有稀释度的菌落数都大于200,计数稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于200的测试片时,也可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成单个方格内的菌落数后乘以20(滤纸区面积为20cm2),即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL(或CFU/g)表示。 经试验,该测试片的检测灵敏度高,特异性强,重复性好。对纯菌的检测下限可达3cfu/mL,与营养琼脂计数、Baird-Parker培养计数和显色培养基计数比较,检测结果均无显著差异。(食品研究与开发2009,30(1):94-97) 5.4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。 6、保存条件 本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水,在拆封前将整包回温至室温。
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