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一）整套试剂及用品
鉴定生化反应的10种试剂（表1）、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
鉴定生化反应的10种试剂（表1）、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
二）西林瓶的使用方法
开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三）副溶血性弧菌生化鉴定盒的详细使用方法
副溶血性弧菌为革兰氏阴性无芽胞杆菌，易呈多形态，有棒状、弧状、卵圆状、球状、丝状等，排列不规则，一般大小为0.3～0.7µm×1～2µm，单端一根鞭毛，有动力，运动活泼，两端浓染，在固体培养条件下能生长周鞭毛。菌落常为隆起，圆形，稍浑浊不透明，表面光滑，湿润，不产生色素。
挑取平板分离的可疑菌落划线接种3%NaCl胰蛋白胨大豆琼脂平板35－37℃培养18－24h，革兰氏染色镜检，并将新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（约0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如右图），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。
注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1
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产品名称
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结果判定
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结果观察
时间（小时）
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使用说明
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阳性
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阴性
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氧化酶试纸
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红色
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不变色
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用玻棒挑取新鲜的培养物于氧化酶试纸表面，观察菌落颜色
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3%NaCl三糖铁琼脂
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产气有气泡，
产酸变黄色，
产硫化氢变黑色，
有动力扩散生长
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无气泡，
不变色
无扩散生长
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24
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，穿刺完毕后在斜面上划“之”字形接种，竖立培育。西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）后竖立培育。
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无盐胨水、3％NaCl胨水、6％NaCl胨水、8％NaCl水、10％NaCl胨水
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生长
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不生长
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24
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3%NaCl甘露醇
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黄色
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紫色
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8－24
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3%NaCl赖氨酸脱羧酶
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试验管蓝绿色，
对照管变黄
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试验管与对照管均变黄
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18－24
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每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支，并加灭菌液体石蜡3－4滴覆盖培养基表面。培养18－24小时，未见阳性结果，继续培养4天，再做最终结果判定。
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3%NaCl 葡萄糖磷酸盐胨水（V-P）
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红色
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不变色
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48
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。
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β－半乳糖苷（ONPG）
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深黄色
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淡黄色或无色
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12－24
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备注：本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。
四）副溶血性弧菌的生化特性见表2
表2 副溶血性弧菌的生化性状
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试验项目
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结果
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革兰氏染色镜检
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阴性，无芽胞，呈棒状、弧状、卵圆状
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氧化酶
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+
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3%NaCl三糖铁琼脂
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底层变黄不变黑，无气泡，斜面不变色或红色加深，穿刺接种处扩散生长
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无盐胨水
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－或微弱生长
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7% NaCl胨水
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+
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10％NaCl胨水
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－或微弱生长
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3%NaCl甘露醇
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+
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3%NaCl赖氨酸脱羧酶
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+
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V-P
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－
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ONPG
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－
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