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一）整套试剂及用品
鉴定生化反应的12种试剂（表1）、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶1 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
鉴定生化反应的12种试剂（表1）、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶1 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
二）生化管的使用方法
开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三）志贺氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
志贺氏菌为需氧性革兰氏阴性无芽胞杆菌，无鞭毛，无动力，生长适宜pH6.4～7.8，适温度为37℃，在选择性或鉴别培养
基上为无色，半透明，微凸起，湿润，边缘整齐，直径约2mm大小的菌落，但宋内氏致贺氏菌常出现R形菌落。
挑取平板分离的可疑菌落进行革兰氏染色镜检，将疑是志贺氏菌的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与1 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成1McFarland ( 约3×108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（约0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如图2），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。
注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1
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产品名称
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结果判定
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培养时间
（小时）
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使用说明
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阳性
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阴性
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三糖铁琼脂
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产酸变黄色
产硫化氢变黑色
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不变色
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24
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，穿刺完毕后在斜面上划“之”字形接种，西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）后竖立培育。
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半固体
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扩散生长
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无扩散生长
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24－48
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺接种，竖立培育。
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葡萄糖铵
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黄色
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不变色
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24
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西蒙氏柠檬酸盐
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蓝色
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不变色
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24－48
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺在斜面上划“之”字形接种，西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）竖立培育。
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赖、鸟氨酸脱羧酶
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试验管蓝绿色，
对照管变黄
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试验管与对照管均变黄
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18－24
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每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支，并加灭菌液体石蜡3－4滴覆盖培养基表面。培养18－24小时，未见阳性结果，继续培养4天，再做终结果判定。
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尿素
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红色
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淡橙红色
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18－24
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ONPG
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深黄色
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淡黄色或无色
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18－24
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水杨苷
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黄色
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紫色
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18－24
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七叶苷
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棕黑色
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不变色
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18－24
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蛋白胨水
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红色
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不变色
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24-48
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接种培养后加入靛基质试剂2-3滴，立即观察结果
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甘露醇、棉子糖、甘油
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黄色
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紫色
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18-24
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粘液酸/质控肉汤
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试验管黄色，对照管不变色
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试验管与对照管均不变色
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24-48
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备注：本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。
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