一)整套试剂及用品
鉴定生化反应的7种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
鉴定生化反应的7种试剂(表1)、10瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、10支一次性吸管。
二)西林瓶的使用方法
开启西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在无菌条件下,按铝盖上的箭头方向打开铝盖,撕开铝盖,打开西林瓶胶塞(如左图)。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三)沙门氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
沙门氏菌为需氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌,有动力,有周鞭毛(但有无动力的变种),最适温度为37℃,最适pH为7.2~7.6,
在固体培养基上37℃ 24h菌落可呈中等大小,光滑,圆形,湿润,隆起,在液体培养基内生长均匀浑浊。
挑取平板分离的可疑菌落接种至营养琼脂平板36±1℃培养18-24h后,将可疑菌落置于已配备的无菌生理盐水,利用0.5 McFarland的浊度管将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(约0.06mL)菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞,一般采用全加塞(如右图左两瓶所示),特殊情况在下表注明采用半加塞(如右图右两瓶所示),直立于内托的凹槽内(如右图),或放置于合适的瓶架中,于35-37℃培养箱中培养。
注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
注意:如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式,请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
四)沙门氏菌生化鉴定特征
自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落,分别接种双糖铁琼脂在双糖铁琼脂内,肠杆菌科常见属种的反应结果见下表。
可疑菌在培养基上的反应
|
阳性或阴性
|
出现此反应者沙门氏菌株百分率
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双糖铁葡萄糖形成酸
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+
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100
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双糖铁葡萄糖产气
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+
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91.9
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双糖铁乳糖
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-
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99.2
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双糖铁硫化氢(H2S)
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+
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91.6
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尿素分解
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-
|
100
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赖氨酸脱羧反应
|
+
|
94.6
|
ONPG
|
-
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98.5
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V-P反应
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-
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98.5
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靛基质反应
|
-
|
98.5
|