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一）整套试剂及用品
鉴定生化反应的15种试剂（表1）、5瓶0.85%无菌生理盐水、1瓶0.5 McFarland的浊度管、5支一次性吸管。
二）生化管的使用方法
开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
三）猪链球菌生化鉴定盒的详细使用方法
猪链球菌为革兰氏阳性成对球菌、短链球菌。挑取羊血琼脂平板上可疑的β溶血和γ溶血菌落进行生化鉴定。
将疑是猪链球菌的新鲜菌苔置于已配备的无菌生理盐水中，与0.5 McFarland的浊度管比浊，将菌悬液制备成0.5McFarland ( 约108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（约0.06mL）菌悬液加入每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如右图），或放置于合适的瓶架中，于35－37℃培养箱中培养，结果观察见表1。
注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1
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产品名称
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结果判定
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培养时间
（小时）
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使用说明
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阳性
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阴性
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葡糖糖磷酸盐胨水（VP）
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红色
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不变色
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48
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。
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七叶苷
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棕黑色
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不变色
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18－24
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6.5％高盐肉汤
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生长
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不生长
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24－48
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pH9.6肉汤
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生长
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不生长
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24－48
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棉子糖、乳糖、甘露糖、山梨醇、阿拉伯糖、
甘露醇、松三糖、
D-核糖、菊糖、甘油
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黄色
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紫色
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18－24
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马尿酸盐
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出现恒久沉淀物
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无出现恒久沉淀物
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42℃ 48h
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将培养液离心沉淀，吸取上清液0.8mL，加入马尿酸盐试剂0.2mL（约4-5滴）立即混合均匀，经10-15min，观察结果。
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四）猪链球菌生化鉴定特征 (见表2)
表2
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VP
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七叶苷
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6.5%高盐肉汤
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pH9.6肉汤
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棉子糖
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乳糖
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甘露糖
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山梨糖
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－
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＋
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－
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－
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＋
|
＋
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－
|
－
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阿拉伯糖
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甘露醇
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松三糖
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D-核糖
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菊糖
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甘油
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马尿酸盐
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－
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－
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－
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－
|
＋
|
－
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－
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