天狼猩红染色液

天狼猩红是阴离子强酸染料, 易与胶原纤维中的碱性基团反应。所以苦味酸天狼猩红染液可使胶原纤维特异性地着染为猩红色,非胶原纤维部分不见猩红色背景,这样的染色结果使得胶原纤维的图像识别效果良好。为心室胶原容积分数测量的准确性提供了保证。此产品为1g天狼猩红,溶解于1000ml苦味酸饱和液中。

保质期：2-8度6个月(暂定)

操作步骤：

1、标本处理：固定过的冰冻切切直接用水洗两到三次;石蜡切片常规脱蜡至水(参考流程: 二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％的乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。)

2、染色方法：将节片泡在染色液中30-60分钟.(因染色时间久,滴加的话染液可能干固，染色时间可根据结果调节)

3、流水冲洗3分钟或者用水泡洗三次，苏木素复染（可选）

4、脱水,透明,中性树胶封片。(参考流程95％乙醇（I）min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min→中性树脂封固)

4、染色结果, 镜下观察.常规显微镜可观察心肌胶原纤维被染成红色, 余心肌组织被染成黄色,或者无色. 偏振光显微镜下可以区分型和III型胶原.

注意事项:

1、 苦味酸有一定毒性，使用此染液请注意防护。

2、 天狼猩红染色后,可用苏木素复染细胞核，以便看清组织结构（但在胶原纤维定量分析中请不要复染核), 使其在光镜下更有助于确定胶原纤维在组织内的分布及与周围细胞的关系。

3、 由于此产品为饱和苦味酸配制，在温度及其他条件变化时可能会产生少量沉淀，并不影响使用，在染色完后，如果有沉淀沾在切片上，也会冲走，如果发现无法冲干净而影响观察，可用滤纸过滤染液后再使用。