卵磷脂吐温80营养琼脂
用 途:
用于化妆品细菌总数测定。(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版,SN/T 2098-2008)。
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;卵磷脂和吐温80能中和防腐剂,并能起到在乳浊液中分散物质的功能,卵磷脂能中和季铵盐,吐温80可中和酚、六氯酚、福尔马林,两者结合可中和乙醇;琼脂是培养基的凝固剂;大多数细菌能还原TTC,使之形成易于辨别的红色菌落,TTC还能减缓某些细菌的蔓延生长。
卵磷脂吐温80营养琼脂 配方(每升):
蛋白胨
|
20g
|
牛肉膏粉
|
3g
|
氯化钠
|
5g
|
琼脂
|
15g
|
卵磷脂
|
1g
|
吐温-80
|
7g
|
终pH7.3±0.2
使用方法:
1、 称取卵磷脂吐温80营养琼脂51g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌20min。
2、 对样品污染情况的估计,选取合适的样品稀释度,在稀释样品的同时,取1mL稀释液加入到无菌平皿中。
3、 加热溶化琼脂,冷至50℃左右,每200mL培养基加入1支2mL0.5%的无菌TTC溶液(029226)可制成TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂,混匀后迅速将培养基加入到平皿中,每皿约15mL,立即转动平皿,待凝固后,翻转平皿,放入培养箱中于36±1℃培养48h。
4、 观察结果。