诺酮类快速检测卡使用说明书

                                                                诺酮类快速检测卡使用说明书

1、诺酮类快速检测卡检测原理

喹诺酮类快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的喹诺酮在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和NC膜检测线上喹诺酮－BSA偶联物的结合。如果样本中喹诺酮含量较高，检测线不显颜色或颜色较浅，结果为阳性；反之，检测线显红色，结果为阴性。

2、诺酮类快速检测卡产品组成

快速检测卡（20个），说明书，一次性塑料吸管(20支)，一次性塑料手套（5只）, 样品缓冲液。

3、诺酮类快速检测卡样品处理

3.1 实验室方法

a)虾、蟹：

⑴取4 g 已搅碎的待测样品于15 mL离心管中。

⑵加入8 mL 二氯甲烷，震荡混合均匀2分钟。

⑶离心5分钟（2300 x g 或3500 r/min)，取下层液(二氯甲烷)6 mL至玻璃管中，于60 ℃下，利用氮气将溶剂吹干。

⑷加入400 µL 样品缓冲液及加入600 µL正己烷回溶，震荡混合。

⑸离心1分钟（2300 x g 或3500 r/min)，吸取最少150 µL下层液待测。

b)组织(鸡/猪/鱼)：

⑴取5g 已搅碎的待测样品于50 mL离心管中。

⑵加入10 mL 0.15N NaOH(pH：11.4)，震荡混合均匀2分钟。

⑶离心10分钟（2300 x g 或3500 r/min)，取上层液(NaOH)8 mL至另一50 mL离心管中并加入12 mL 二氯甲烷，轻摇混合(避免剧烈震荡)。

⑷离心5分钟（2300 x g 或3500 rpm)，取下层液(二氯甲烷)7 mL至玻璃管中，于60 ℃下，利用氮气将溶剂吹干。

⑸加入300 µL 样品缓冲液及加入600 µL正己烷回溶，震荡混合。

⑹离心1分钟（2300 x g 或3500 r/min)，吸取最少150 µL下层液待测。

3.2 现场方法

a)虾、蟹：

⑹取5g已搅碎的待测样品于50 mL离心管中。

⑺加入10mL 二氯甲烷，震荡混合均匀2分钟。

⑻取少量脱脂棉放入漏斗底部，将上述处理样本倒入漏斗，过滤并收集滤液。取下层液(二氯甲烷)7.5 mL，于60 ℃下，利用样本浓缩仪将溶剂吹干。

⑼加入400µL样品缓冲液及加入600 µL正己烷回溶，震荡混合。

⑽掌式离心机离心5分钟，吸取最少150 µL下层液待测。

b)组织(鸡/猪/鱼)：

⑺取5g 已搅碎的待测样品于50 mL离心管中。

⑻加入15 mL 0.15N NaOH(pH：11.4)，震荡混合均匀2分钟。

⑼取少量脱脂棉放入漏斗底部，将上述处理样本倒入漏斗，过滤并收集滤液，取上层液(NaOH)10 mL至另一50 mL离心管中并加入10 mL 二氯甲烷，轻摇混合(避免剧烈震荡)。

⑽离心5分钟（2300 x g 或3500 rpm)，取下层液(二氯甲烷)7 mL至玻璃管中，于60 ℃下，利用样本浓缩仪将溶剂吹干。

⑾加入300 µL 样品缓冲液及加入600 µL正己烷回溶，震荡混合。

⑿掌式离心机离心5分钟，吸取最少150 µL下层液待测。

4、诺酮类快速检测卡操作步骤以及结果判读：

⑴测试前将未开封的检测卡及待检样品溶液恢复至室温。

⑵从原包装铝箔袋中取出检测卡，在半小时内使用。

⑶将检测卡平放，用塑料吸管垂直滴加3滴无气泡样本(约70ul)于加样孔。

⑷反应10分钟后判断结果：

阴性结果 : T线比C线深，或一样深，表示样品喹诺酮类浓度低于其灵敏度。

阳性结果 : T线比C线淡，表示样品喹诺酮类浓度高于其灵敏度。

无效反应: 如果测试结果C线未出现，表示此试剂已失效

5、诺酮类快速检测卡检测灵敏度

6、诺酮类快速检测卡储存及有效期：

原包装在4-30℃阴凉避光干燥处储存，有效期为12个月，生产日期及有效期见包装盒。

7、诺酮类快速检测卡注意事项：

⑴检测卡在室温下一次性使用，请勿重复使用。

⑵操作时请勿触摸试纸显示区，检测时避免阳光直射及风扇直吹。

⑶若出现阳性结果，建议用本卡复查一次。