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一）生化管的使用方法
开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞（如左图）。所有的西林瓶在使用后均高压灭菌后方可弃去。
二）小肠结肠炎耶尔森氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
二）小肠结肠炎耶尔森氏菌生化鉴定盒的详细使用方法
小肠结肠炎耶尔森氏菌为革兰氏阴性杆菌或球杆菌，大小为0.8～3.0µm×0.8µm，不形成芽胞，无夹膜，有周鞭毛，但不稳定，
于26℃培养物中可见周鞭毛，30℃以上易消失，26℃培养有动力，37℃培养时或在陈旧培养物中趋向多形性。最适温度为22～29℃。
挑取平板分离的可疑菌落接种于改良克氏双糖于26℃24h培养，阳性者取少量菌苔接种于每种微量生化管内。将已接种的西林瓶再套上胶塞，一般采用全加塞（如右图左两瓶所示），特殊情况在下表注明采用半加塞（如右图右两瓶所示），直立于内托的凹槽内（如图2），或放置于合适的瓶架中，于26℃培养箱中培养，结果观察见表1。注意：如有特殊的接种方式、培养时间或培养方式，请详见每种生化鉴定管附带的使用说明。
表1
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产品名称
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结果判定
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培养时间
（小时）
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使用说明
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阳性
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阴性
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半固体琼脂
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扩散生长
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无扩散生长
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24
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用接种针挑取新鲜菌苔穿刺，在26℃、37℃竖立培养24h。
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尿素
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桃红色
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淡橙红色
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24
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挑取一接种环的菌苔接种。
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葡萄糖磷酸盐胨水（VP）
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红色
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不变色
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48
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西林瓶半加塞（如图2右两瓶所示）培养后依次加入8滴VP试剂甲液及4滴乙液，混匀，再培养10－20分钟观察结果。
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鸟氨酸脱羧酶
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试验管蓝绿色，
对照管变黄
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试验管与对照管均变黄
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18－24
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每株被检菌应同时接种氨基酸对照管一支，并加灭菌液体石蜡3－4滴覆盖培养基表面。培养18－24小时，未见阳性结果，继续培养4天，再做最终结果判定。
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蔗糖、棉子糖、
山梨糖、甘露醇、
鼠李糖
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黄色
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紫色
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18－24
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备注：本鉴定盒是按照环凯产品目录中的品种成份从左到右的顺序摆放。
三）小肠结肠炎耶尔森氏菌的鉴定特征见表2 （只供参考）
尿素酶试验和动力观察：将改良克氏双糖上的可疑培养物接种到尿素培养基上，挑取一接种环，振摇几分钟，放置于
26℃培养2～4小时，然后将阳性者接种两管半固体，分别放置26℃和37℃孵箱，培养24小时检查，如在26℃有动力者可进
行镜检和进一步的生化试验。
表2 小肠结肠炎耶尔森氏菌与其他相似菌的生化性状鉴别表（皆在26℃培养）
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项目
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小肠结肠炎
耶尔森氏菌
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中间型耶尔森氏菌
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弗氏耶
尔森氏菌
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克氏耶
尔森氏菌
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假结核耶
尔森氏菌
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鼠疫耶
尔森氏菌
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动力（26℃）
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+
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+
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+
|
+
|
+
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-
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尿素酶
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+
|
+
|
+
|
+
|
+
|
-
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V-P试验（26℃）
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+
|
+
|
+
|
-
|
-
|
-
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鸟氨酸脱羧酶
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+
|
+
|
+
|
+
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-
|
-
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蔗糖
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d
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+
|
+
|
-
|
-
|
-
|
|
棉子糖
|
-
|
+
|
-
|
-
|
-
|
d
|
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山梨醇
|
+
|
+
|
+
|
+
|
-
|
-
|
|
甘露醇
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+
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+
|
+
|
+
|
+
|
+
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鼠李糖
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-
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+
|
+
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-
|
-
|
+
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注：“+”阳性；“—”阴性；“d”有不同生化型。
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