IAC-SEP®黄曲霉毒素M1免疫亲和柱
(产品编号:IAC102)
使用对象
Afla M1免疫亲和柱能够特异性的纯化牛奶及奶制品中黄曲霉毒素 M1。由于采用了生物技术,该方法可以不使用有毒溶剂如氯仿和二氯甲烷检测黄曲霉毒素M1的含量。Afla M1黄曲霉毒素免疫亲和柱可以广泛地应用于牛奶加工厂质量管理实验室和政府检测实验室。此方法速度快、操作简单、准确性高,同时能做到提高奶质,不产生污染。
IAC-SEP®黄曲霉毒素M1免疫亲和柱适用于以下标准:
GB/T 18980-2003 乳和乳粉中黄曲霉毒素M1的测定-免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法
GB/T 23212-2008 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的测定-液相色谱荧光检测法
GB/T 5413.37-2010 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定
SN/T 1664-2005 乳和乳粉中黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2的测定
原理
样品经前处理后,然后通过键合有黄曲霉毒素特殊抗体的免疫亲和柱。此时,黄曲霉毒素M1被亲和柱中的抗体特异性的吸附,用水或缓冲液将免疫亲和柱上的杂质除去,然后用甲醇使抗体变性,从而将黄曲霉毒素M1从亲和柱上洗脱下来。,用HPLC或荧光计进行定量检测。
储存条件
该亲和柱保存在2-8 °C条件下,不能冷冻,保质期为18个月。建议在室温(18-30°C)下使用。
实验溶液制备
HPLC流动相,水-乙腈-甲醇(68+24+8,v/v):取240mL乙腈和80mL水甲醇加680mL水,混合均匀,用0.22微米的尼龙筛过滤。
标准溶液的配制:取黄曲霉毒素M1标准品,用流动相稀释到所需工作浓度。
注:配制好的标准品溶液2-8℃冷藏保存有效期为24h。
液相色谱条件
色谱柱:Cloversil-C18 4.6*150mm(5um)或4.6*250mm(5um)
流动相:水-乙腈-甲醇(68+24+8,v/v)
流速:0.8mL/min
检测器:荧光检测器,激发波长360nm,发射波长440nm
紫外检测器:波长365nm(紫外检测方法:建议标准曲线浓度:5-50ng/ml)
进样体积:20~100uL
高效液相色谱仪检测黄曲霉毒素M1的标准谱图
注意事项
1) 不要随便更改操作说明书中的操作步骤,如需更改要和本公司技术部联系,确认更改是否合理。
2) 操作步骤中,样品过柱,淋洗,洗脱时,一定要控制好流速,不能太快,否则会使检测结果偏低。
3) 如果将标准品直接过柱验证回收率时,一定要确保标准上柱液中甲醇浓度不要超过5%,否则会影响柱子的吸附能力。
4) 试验中使用的玻璃仪器等,一定要清洗干净,尤其是用次氯酸等处理过的仪器,否则会使检测结果偏低。
5) 当用氮气浓缩洗脱液时,氮气流不要太大,否则会损失部分黄曲霉毒素M1
需要准备的设备及试剂(中检维康提供)
C/N编号 |
物品 |
21022 |
Clover六位泵流操作架(配有1台空气泵,6个10mL针筒) |
20202 |
高速匀质器,转速可达18,000 r/min ~22,000 r/min |
31955 |
美国vicam微纤维滤纸(1.5um,100张/盒) |
31240 |
折叠式槽纹滤纸(100张/盒),或中速定性滤纸 |
36010 |
一次性塑料烧杯(25/包) |
34000 |
一次性测试管(250支/包) |
36020 |
塑料漏斗(10 个/包) |
|
黄曲霉毒素M1标准品 |
35016 |
色谱纯级的甲醇(4升/瓶) |
C546150-U |
Cloversil C18 反相色谱柱4.6*150mm(5um) |
C546250-U |
Cloversil C18 反相色谱柱4.6*250mm(5um) |
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奶粉等基质含有不同水平黄曲霉毒素M1的质控样品 |
北京中检维康生物技术有限公司
销售总经理 弓全全
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