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科研试剂 世纪元亨猪捷申病毒实时荧光RT-PCR试剂盒

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最后更新: 2020-10-21 09:57
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产品详细说明
 世纪元亨猪捷申病毒实时荧光RT-PCR试剂盒
 
猪传染性脑脊髓炎(swine infectious encephalomyelitis,SIE)又名猪捷申病(Teschen disease)、猪脑髓灰质炎(Poliomyelitis suum)、猪泰法病(Talfan disease)、塔尔凡病,本病是由小RNA病毒科肠道病毒属病毒引起的一种接触性传染病。主要引起猪脑脊髓炎、母猪繁殖障碍、肺炎、下痢、心包炎和心肌炎。以侵害中枢神经系统引起共济失调,肌肉抽搐和肢体麻痹等一系列神经症状。
 
主要危害作物

 
别名
猪传染性脑脊髓炎
 
病原
猪捷申病毒属于小RNA病毒科肠道病毒属,1999年病毒分类学委员会将肠道病毒属猪肠道病毒中的11个血清型列为捷申病毒属。
 
捷申病毒粒子由蛋白外壳和内部核心组成,成球形,直径25-30nm,无囊膜,其外层包裹核衣壳,衣壳由32个壳粒组成,无脂蛋白。病毒衣壳由4种蛋白即VP1、VP2、VP3、VP4各60个拷贝组成,其中VP1和VP3是主要免疫性抗原。病毒核心为单股正链RNA,约有7200个核苷酸,在氯化铯中的浮密度为1.34g/cm3 ,分子量2.5×106 u 。病毒用乙醚、氯仿等脂溶剂处理稳定,对多种消毒剂具有相应抵抗力,但它能被次氯酸钠和70%乙醇完全灭活。在4℃时,病毒于pH3-9环境中能够存活24h以上;56℃仍能存活30-120min。用冻干的方法保存,会大大降低其滴度,因此大多数情况下时是用50%甘油对其保存,在4℃时可长时间维持其稳定的毒力,于-70℃则具有多年的存活期。迄今,尚未发现猪传染性脑脊髓炎病毒有凝集和吸附红细胞的能力。
1929年,本病发现于原捷克斯洛伐克的捷申地区,故又称为捷申病。1931年由Klobouk氏作为一种新病而描述。随后在中欧、西欧、北美以及澳大利亚和非洲也相继有了报道。1955年-1957年,丹麦和英国发现猪的一种轻症麻痹病,称为泰法病,也称台劳病,良性地方性轻瘫。后来证明其病原体也是猪传染性脑脊髓炎病毒,只是其毒力较弱。严重病型只见于中欧和马达加斯加。中欧的流行区包括原捷克斯洛伐克和奥地利以及相邻的波兰、南斯拉夫和匈牙利地区,在这些国家呈地方性流行。散发的病例见于瑞士、意大利北部、法国和德国。
在第二次世界大战初期和末期,此病流行特别严重,自二十世纪六十年代来,本病广泛分布于丹麦、英国、加拿大、美国和澳大利亚等地。该病发病率和死亡率都很高,可危害各种年龄的猪,造成严重的经济损失。
 
3.我国情况:
此病毒在国内研究不是很多,哈尔滨兽医研究所在2003年分离到血清型1型,说明我国也有该病毒存在。到目前为止,该病已经成为世界范围内猪重要传染病之一。
 
4.流行特点:
(1)病猪和带毒猪是本病的传染源。病猪无论是在临诊症状期还是在潜伏期都具有传染性,危险的阶段是在潜伏期和发病初期。本病在发病天传染率为存栏头数的15%-40%,随后逐渐降低。病毒主要存在于病猪的脑脊髓中,但在感染后几周内可随分泌物(唾液等)和排泄物(粪便)排出。外观正常的猪,特别是4-8周龄以上的猪体内,常可以分离到病毒。说明健康猪带毒现象或隐性感染普遍存在。只有强毒毒株才能引起暴发流行。因此,在临诊上隐性感染的猪,对疫病的传播起着重要作用。
猪传染性脑脊髓炎通过直接或间接接触感染,消化道是主要的感染途径。
随分泌物、粪便等排出的病毒,可以通过饲料、饮水、用具、铺垫物传染给健康猪;工作人员也可能机械传播。不排除鸟类、啮齿类动物及飞蝇对病毒的传播。
有报道,PEV还可经呼吸道传染,但在Romanenko,VF的实验中,曾将三头小猪置于空气唾沫传染状态下,另外两头在其周围撒上病猪的尿液,都未能使其感染。
人工感染可经口、脑内或鼻内接种等方法。皮下注入病毒很难发生猪感染。PEV只感染猪,包括家猪和野猪。
幼龄仔猪,特别是2-6个月龄的断奶仔猪和架子猪易感染,而成年猪多为隐性感染,很少发病。哺乳仔猪的肠道中很少能够分离到病毒,这可能是吮乳仔猪随初乳获得母源抗体的缘故。自然感染后猪只能产生免疫性。
实验证明给小鼠、大鼠、豚鼠和家兔等实验动物,以及牛、马、羊等牲畜作人工病毒接种,不能引起感染。对鸡胚也不能感染。
各血清型的致病力有较大差异,因此,发病率、死亡率和流行形式也往往不同。在新发病的猪群中,本病常呈暴发式,逐渐蔓延全群,老疫区常为散发。
本病可在一年内的任何季节发生,但在深秋和初春更为严重。
(2)由血清型1型引起的脑脊髓灰质被兽疫局(OIE)列为B类传染病。捷申病的发病率可达50%,病死率可达70%-90%。
本病的血清型不少于10种,不同血清型的毒株,其致病性不同,除了引起脑脊髓灰质炎外,该病还可引起母猪繁殖障碍、肺炎、下痢、心包炎和心肌炎等,并且他们之间有一定的相关性。迄今,还不清楚8、10血清型毒株的致病性,有待于进一步的研究。
猪是捷申病的宿主,各种年龄的猪均易感,幼龄猪易感性。该病感染率虽高,但病死率却因日龄而异,哺乳仔猪几乎死亡,3周龄以上的猪症状或阴性感染。病毒在肠道内大量繁殖,并通过粪便排除体外,,排毒时间可达数周,被污染的饲粮和饮水可经消化道再感染其他健康猪,也可通过眼结膜、生殖道和呼吸道粘膜感染。任何年龄猪都可感染多种血清型毒株,因此在同一个猪群中经常存在几个血清型。成年猪通常具有很高的循环抗体水平,哺乳仔猪则因母乳中的抗体而不感染。当该病呈地方性流行活发生于免疫猪群时,发病主要局限在生长期幼猪和断奶仔猪,未免疫或抗体水平抵的母猪和哺乳仔猪也可能有散发病例,在诊断时应予以注意。
 
致病机理
自然感染病例,猪捷申病病毒经口进入机体后,首先在扁桃体和肠道中复制,主要在咽喉部淋巴网状组织和肠道粘膜组织中增值,与前段肠道相比,回肠和大肠更容易感染,在感染的组织中有较高滴度。到目前为止,还不清楚肠道中哪种细胞适合病毒的复制,不过根据该病毒的试验结果类推,可能是肠固有层中的网状内皮组织。感染血清1型毒株后,常可引起病毒血症;但毒力较弱滴毒株,不常见其引起病毒血症。
麻痹症状是中枢神经系统受到感染的结果。病毒是通过血液或神经的途径达到中枢神经系统,可以分为三个阶段:病毒在肠道上皮和局部淋巴结中繁殖;病毒随着血液循环到全身;病毒在中枢神经系统繁殖。
感染过程可能在任何一个阶段趋于静止,在临诊上表现为从急性型到亚急性型和隐性型各种过渡。
临床症状
捷申病的临床表现多种多样,但以死木胎症候群为主。临床上分为4个型:即:急性型、亚急性型、慢性型和隐性型。
1.本病潜伏期为2-28天,病猪首先出现体温升高,多在40.0-41.1℃左右或更高,病猪表现为厌食、倦怠、呕吐、严重鼻炎、及行动失调。1-2天后,体温降至正常,出现中枢神经系统的症状,如:寒战、感觉过敏、抽搐、共济失调,四肢僵直(特别是后肢)、角弓反张和昏迷,接着发生麻痹,病猪呈犬坐姿势或于一侧卧地,前肢作划水样,受声响或触摸刺激时,可引起四肢不协调的运动,或角弓反张,也可见面部麻痹和失音。病猪发生便秘。传染性脑脊髓炎的病程发展迅猛,瘫痪出现后的2到3天,就有80%-95%的病猪可因呼吸中枢麻痹而死亡,有些病猪死于吸入性肺炎,有些病例于急性期之后食欲有所恢复,如能精心护理常可耐过,但见消瘦并有麻痹症状。
2.该病的亚急性期为6-8天,死亡较少。
3.慢性传染性脑脊髓炎多发于成年猪,病程为几周到几个月,特征为沉郁、行动困难、尾部麻痹、前肢瘫痪。其中有20%的病猪因肺炎、褥疮、败血症等原因而死亡。
4.由毒力较低的毒株引起的则症状较轻,发病率和死亡率均较低,主要侵害仔猪。病初体温升高,运动失调和背部软弱。这些症状大多可在几天内消失,但有些病猪则随后出现易兴奋、发抖、平衡失调、运动失控、肢体麻痹等症状。
病理变化
剖检死亡猪时可检皮下、大肠及肠系膜水肿,胸腔和心包积液、脑膜和肾皮质有出血点。组织学检查可见脑脊髓血管周围水肿、出血和淋巴细胞浸润,延脑髓质中枢神经胶质细胞增生。死于本病的猪有的可见肺心叶、尖叶及中间叶有灰质实变区,肺泡及气管内有渗出液,严重的有心肌坏死和浆液性纤维素性心包炎病变。有时,猪死于该病,但观察不到特征性的病变。
诊断方法
1.细胞分离培养:捷申病传统的诊断技术是在细胞上分离培养,并用敏感的方法进行检测。电子显微镜负染技术可在电镜下区分其它引起神经症状的病原,如狂犬病病毒等,但是对于同样的小RNA病毒属的其他成员则不能区分。免疫电镜技术在标准阳性血清的作用下可用于病毒的鉴别诊断。
2.血清学试验:捷申病毒的血清学诊断方法还有免疫荧光试验(IF)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)及病毒中和试验(VNT)等。目前应用广泛的是IF和ELISA,但由于捷申病毒多血清型的存在,有权威的检测方法还是VNT。其他的检测方法如补体结合试验等,虽然敏感,但容易产生部分血清型的交叉感染。
3.分之生物学方法:该方法是诊断疾病、检测抗原可靠的方法,因为生物个体间的DNA或RNA是完全特异性的。对于捷申病毒而言,它具有单股正链RNA,因此建立起具有针对性的RT-PCR和nested-PCR,对猪捷申病的诊断、预防具有深远的意义。

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